A matériában saját hősöket kreálhatunk, amelyeket teljesen személyre szabhatunk, egy-egy küldetés erejéig pedig csatlakozhatunk a népszerű szuperhősökhöz. Az alkotás a jó és a rossz közötti küzdelemről szól, a játék elején választhatunk, hogy melyik tábort szeretnénk képviselni. A szoftverben lehetőség lesz szintlépésre, a sikeres küldetések elvégzése után tapasztalati pontokra tehetünk szert, amelyek segítségével fejleszthetjük karakterünket. A DC Universe Online-ban számos ismert szuperhőssel találkozhatunk, például Batman-nel, Robin-nal, Superman-nel, Macskanővel, Madárijesztővel, Joker-rel, Zöld Lámpással, Csodanővel és más neves személyekkel.