A szoftverben lesznek lovaskocsis menekülős küldetések, ezen felül lehetőségünk lesz hajók bombázására is. A matériába új mozdulatokat, képességeket integráltak a készítők, továbbá hősünk új fegyverek segítségével kaszabolhatja le az ellenséget. Az Assassin’s Creed Brotherhood-ban Ezio-nak Rómában kell bizonyítania rátermettségét, a feladata az, hogy megdöntse a Templomos rend hatalmát és egy saját céhet kell alapítania, hogy pártfogói segítségével győzelmet arathasson. A programban Róma valósághű mását láthatjuk, a készítők odafigyeltek, hogy részletesen és kidolgozottan jelenítsék meg az olasz fővárost.